大腸桿菌培養步驟方法大致如下：

　　1.準備培養基：大腸桿菌通常在LB（Luria-Bertani）培養基中生長良好，可以選擇購買已經配好的LB培養基或自行配制。

　　2.接種培養基：將已經處理好的大腸桿菌進行接種，可以采取挑菌、滴菌、擴菌等不同的接種方法。

　　3.培養條件：將接種好的菌液在37℃恒溫搖床上進行培養，一般需要培養12-18小時，直到培養物中的細菌數量增加到一定程度。

　　4.檢測菌液狀態：使用光學顯微鏡檢測培養液狀態，觀察大腸桿菌細胞的狀態、形態等特征。

　　5.采集菌液：在培養物增殖到一定程度后，采集大腸桿菌菌液，可以進行下一步的實驗、分離、純化等操作。

　　注意事項：

　　1.準備培養基、接種菌液、培養條件等操作要嚴格遵循無菌操作規程，防止外界污染。

　　2.在培養過程中要根據實驗需要不斷調整培養條件，如溫度、鹽度等，以期獲得更好的生長效果。

　　3.在處理大腸桿菌菌液時，一定要注意安全防護，避免對人體造成危害。